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http://repositoriodspace.unipamplona.edu.co/jspui/handle/20.500.12744/703| Título : | Detección de quistes de Giardia Lamblia a partir de aguas residuales usando separación fluoro-inmunomagnética. |
| Autor : | González Ortiz, Michael Key. |
| Palabras clave : | El autor no proporciona información sobre este ítem. |
| Fecha de publicación : | 2018 |
| Editorial : | Universidad de Pamplona-Facultad de Ciencias Básicas. |
| Citación : | González Ortiz, M. K. (2017). Detección de quistes de Giardia Lamblia a partir de aguas residuales usando separación fluoro-inmunomagnética [Trabajo de Grado Pregrado, Universidad de Pamplona]. Repositorio Hulago Universidad de Pamplona. http://repositoriodspace.unipamplona.edu.co/jspui/handle/20.500.12744/703 |
| Resumen : | El autor no proporciona información sobre este Ítem. |
| Descripción : | El estudio de Giardia sp, en aguas es de vital importancia ya que este es un parásito intestinal que ataca principalmente la población infantil. El quiste llega a la cadena alimenticia a través de vehículos trasmisores tales como el agua de donde son expulsados por medio de heces humanas o animales. Las técnicas convencionales de detección están basadas en el uso de microscopía óptica previo a su concentración a través de técnicas como la de Ritchie, Sheather, Faust, Telemann, MIF Mertiolato/Yodo/Formol. También se encuentran métodos más avanzados como: Método por precipitación, Determinación de antígenos por ‘ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA), Inmunofluorescencia, Citometría de Flujo, reacción en cadena de la polimerasa (PCR), etc. Aunque estos métodos son efectivos, en el país no se han podido introducir masivamente posiblemente debido a que algunos se pueden ver afectados por las técnicas de concentración utilizadas, en el caso de las técnicas de fluorescencia hay sustratos del medio ambiente que pueden emitir fluorescencia, no siempre se trata de métodos flexibles, la falta de disponibilidad regular de los paquetes en el mercado y que algunos de estos métodos también detectan los microorganismos muertos. La metodología IMS trabajada en este proyecto a pesar de que sus materiales son costosos comparada con las técnicas convencionales, IMS proporciona suspensiones más limpias de quistes de Giardia de muestras de agua de turbidez baja y alta. También se ha demostrado que el procedimiento es adaptable a la recuperación de organismos individuales para posteriores procesamientos que incluyan determinar el tipo molecular y para la evaluación de la viabilidad. Por tal motivo, en este estudio se reporta por primera vez el uso de una técnica de separación magnética modificada que emplea micropartículas magnéticas que permiten la concentración y separación de los quistes a partir de muestras de matrices complejas como lo es el agua residual y adicional a esta propiedad, posee integrada a su estructura un núcleo fluorescente que permite realizar de manera más sencilla la identificación del quiste del parásito. Las micropartículas fueron funcionalizadas con anticuerpo monoclonales anti-Giardia, lo que facilitó la detección del patógeno a través de la interacción antígeno-anticuerpo. Los quistes fueron concentrados y separados empleando un campo magnético externo, mientras que la visualización se hizo empleando microscopía de fluorescencia. La efectividad de esta técnica se contrastó con la filtración por membrana usando filtro millipore de 0.45 µm y los ensayos se hicieron tanto en muestras de agua destilada contaminadas artificialmente como en muestras reales de aguas residuales provenientes del río. Los resultados permitieron determinar que la técnica fluoroinmunomagnética permite la concentración, separación y detección de quistes de Giardia en tan sólo 1 Lt de agua. Además, la técnica mostró ser selectiva ya que en presencia de otro tipo de parásito como Entamoeaba coli no se presentaron reacciones cruzadas. En comparación con la filtración por membrana mostró mayor sensibilidad en la detección ya que en todos los análisis hechos en 1 lt de agua la técnica fluoro-inmunomagnética siempre permitió la recuperación de quistes del parásito. Por tanto, se pudo concluir a través de esta investigación que es posible detectar de forma rápida, sensible y selectiva quistes de Giardia lamblia a partir de aguas residuales. |
| URI : | http://repositoriodspace.unipamplona.edu.co/jspui/handle/20.500.12744/703 |
| Aparece en las colecciones: | Biología |
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| Fichero | Descripción | Tamaño | Formato | |
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